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简单困难样本全覆盖提取真菌DNA 搭配高通量解决方案高产高效
如果遇到像革兰氏阳性菌等困难样本
最后也很难达到很好的提取效果…
图1:革兰氏阳性菌
提取革兰氏阳性菌基因组DNA,尝试了那么多种方法:提取得率高的方法,基因组DNA质量差、纯度低!基因组DNA质量高的方法,效果时好时坏,不稳定!
目前通行的分子生物学手册中,提取基因组总DNA均以革兰氏阴性菌大肠杆菌为例,这些方法不能有效地提取革兰氏阳性菌的基因组DNA。目前为止,有关专著及文献对革兰氏阳性菌基因组 DNA 的提取方法虽有些报道,但是步骤较为复杂,涉及的试剂较多。为此,需要有一种快速、简便、技术要求较低的革兰氏阳性菌DNA提取试剂盒。凡知医学的革兰氏阳性菌/真菌DNA提取试剂盒(磁珠法)及FireAuto96全自动核酸提取仪重磅上线!
革兰氏阳性菌/真菌DNA提取试剂盒(磁珠法)优势:
磁珠法DNA提取能够实现自动化、大批量操作;操作简单、用时短;不使用传统方法中的酚、氯仿等有毒试剂,安全无毒完全符合现代环保理念;与核酸的特异性结合使得提取的核酸纯度高、浓度大。
革兰氏阳性菌/真菌DNA提取试剂盒(磁珠法)磁珠表面连接了可特异地与核酸发生作用的功能基团,具有特异性吸附DNA的特点,搭配纯化试剂,可较大限度地去除RNA、蛋白、脂类及其他杂质,提取DNA的纯度高、完整性好。
酶解法是最常用的方法,但该方法试剂耗材价格昂贵,成本较高,且步骤多、费时,操作过程中易产生蛋白酶残留,导致PCR反应受到抑制;酚、氯仿等有机溶剂易造成环境污染,有损实验操作者的健康。
研磨法是将细胞在珠磨机中破碎,被认为是最有效的一种细胞物理破碎法。进入珠磨机的细胞悬浮液与极细的玻璃小珠、石英砂、氧化铝等研磨剂 (直径<1mm)一起快速搅拌或研磨,珠子与细胞之间的互相剪切、碰撞,使细胞破碎,释放出内含物。研磨法兼具破碎和冷却双重功能,减少了产物失活的可能性,在适当条件下,一次操作即可达到较高的破碎率。
图2:革兰氏阳性菌的细胞壁及肽聚糖结构
由图2可见,革兰氏阳性菌(G+)具有较厚的肽聚糖细胞壁结构,细胞壁厚结构复杂难破碎。革兰氏阳性菌/真菌DNA提取试剂盒(磁珠法)利用物理破碎与酶学消化相结合的裂解方法,使核酸大量释放,成倍提高核酸提取回收率,有效避免因破壁不充分引发的假阴性结果。
当产品投入到实际应用时,面对大量的待测样本,为了提高整个检测流程的效率,同时降低人为因素带来的误差及人力资源的投入,核酸提取的步骤及试剂应能够匹配自动化平台,进而实现对样本的高通量高效率的提取。
革兰氏阳性菌/真菌DNA提取试剂盒(磁珠法),具有高质高产、适用广泛、场景灵活、过程安全的特点,既可支持手动提取,也可高效地与液体工作站或全自动核酸提取仪配套使用,能在短时间内完成对大量样品的提取,以进行快速、大样本量的提取,提升整体效率。特别适合于同时处理大量样本及基础条件一般的实验室使用,提取DNA的产量高、完整性好,浓度可达100~300ng/μl。
适用于多种分子生物学实验,包括酶切、文库构建、分子克隆、PCR、RT-PCR、高通量测序等多种下游实验。
图3:凡知革兰氏阳性菌/真菌DNA提取试剂盒
(磁珠法)
· 过程安全:提取过程安全,不涉及有毒的酚、氯仿、β-巯基乙醇等有机溶剂。
利用本产品及A厂家试剂盒分别对革兰氏阳性菌(金黄色葡萄球菌)进行DNA提取,结果显示本产品提取的DNA优于市场上同类产品,可较大限度地去除RNA、蛋白、脂类及其他杂质,提取DNA的纯度高、完整性好。
图4:凡知试剂盒与美国A公司试剂盒
结果对比展示
当配合凡知FireAuto96全自动核酸提取仪使用,提取效果更佳,可同时处理1-96个样本,省时省力。
图5:凡知FireAuto96全自动核酸提取仪
· 场景灵活:独特振幅设计,适应各类微小磁珠;孔板结构深度优化,适配市场上95%的深孔板;开放式系统,可匹配市面上各类磁珠法核酸纯化试剂盒。
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